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细胞冻存复苏小窍门
Q1：细胞复苏、冻存注意事项有哪些？
1、细胞冻存时，一定要确保细胞状态良好：处于生长对数期，密度适中（一般70%-80%），且没有污染；
2、冻存过程中处理细胞要轻柔，消化时间不宜过长，避免反复吹打细胞；
3、冻存细胞数量需合适：冻存液一般为1ml每管，细胞量在2*106左右，对于易死的细胞或有密度依赖性的细胞细胞数量可在5*106左右；
4、细胞冻存时，确保盖子拧紧，并选择配套的管子和盖子；
5、冻存细胞时，不可直接将细胞放入-80℃，需严格进行梯度降温，且-80℃的细胞过夜冻存后尽快转移至液氮罐中长期保存；
6、细胞复苏时，水浴时间不宜过长，若室温较低可适当的提高水浴温度至38℃；
7、复苏时从液氮罐拿出之后，马上放到水浴锅中进行融解，期间可以晃动冻存管有助于快速融化，并且尽快离心去除冻存液，减少冻存液对细胞的伤害；
8、吹打细胞时要轻柔，同时使用预热的完全培养基培养细胞。
