旗赛生物科技（武汉）有限公司
陕西 新疆 西藏 
吕经理：17786109808
东北 山东 四川 云南 刘经理：15623218067
浙江 江苏 上海 安徽 李经理：15827301505
湖北 湖南 江西 朱经理：18571478042
广西 贵州 广东 福建 殷经理：18771934194
河南 河北 北京 山西 天津 胡经理：18707163327
邮箱：postmaster@keycell.cn
地址：东湖新技术开发区高新大道 666号武汉国家生物产业基地
产品图片
产品简介
3T3-L1细胞成脂诱导分化培养基是一款专用于3T3-L1细胞体外诱导分化成脂细胞的培养基。试剂盒里面包含诱导所需所有成分，无需额外添加。
详细信息
组分名称 | 组分规格 | 组分货号 | 保存条件 | 有效期 |
3T3-L1成脂诱导基础培养基A液 | 87.5ml | QS-S503-A | 2~8℃ | 12 months |
3T3-L1成脂诱导添加物A液 | 2.5ml | QS-S503-B | -20℃ | 12 months |
3T3-L1成脂诱导胎牛血清A液 | 10ml | QS-S503-C | -20℃ | 24 months |
3T3-L1成脂诱导基础培养基B液 | 88.5ml | QS-S503-D | 2~8℃ | 12 months |
3T3-L1成脂诱导添加物B液 | 1.5ml | QS-S503-E | -20℃ | 12 months |
3T3-L1成脂诱导胎牛血清B液 | 10ml | QS-S503-F | -20℃ | 24 months |
使用方法
1. 成脂诱导分化操作
1.1 明胶包被培养器皿
干细胞培养较长时间后，可能会出现脱壁卷边或漂浮现象，建议使用0.1%明胶溶液对培养器皿进行包被。准备合适的培养器皿，取适量明胶覆盖底面，37°C静置30 min，吸取晾干即可使用。
1.2 接种细胞
取对数生长期的细胞，按照1.0-2.0×10e4 cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO2培养环境下培养至汇合度90%左右，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基A液。
1.3 细胞分化诱导
37℃，5% CO2培养环境下培养约3d后，更换为成脂诱导分化培养基B液，培养1d后，再更换为成脂诱导分化培养基A液。A液和 B 液交替使用，期间需每天观察细胞状态。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小，决定终止细胞诱导的时间，并进行染色鉴定。
2. 染色鉴定
2.1 细胞固定
吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30~60 min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
2.2 油红O染色
取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液（油红O原液: 生理盐水=3:2），现用现配。配制后可对油红O工作液进行离心，以沉淀染色液中的过饱和析出物。向清洗干净的诱导孔内加入适量油红O工作液，静置染色30min。吸走油红O工作液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
2.3 诱导评估
显微镜下观察成脂染色效果，并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时，脂滴与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE: 3T3-L1的成脂分化水平因细胞来源，细胞代次，细胞状态和分化时间等因素而异。
注意事项
1. 本产品组分均为无菌分装，可直接配制成完全培养基使用。
2. 完全培养基储存条件：2~8℃，避光；配制后有效期：2 weeks，配制后请在有效期内使用完毕。
3. 本品可分装冻存，避免反复冻融，使用时注意无菌操作。
4. 本产品仅用于科研实验，不可用于临床治疗。
