旗赛生物科技(武汉)有限公司
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产品简介
RAW264.7 破骨诱导培养基是一款专用于RAW264.7体外诱导分化成破骨细胞的培养基。试剂盒里面包含诱导所需所有成分,无需额外添加。
详细信息
组分名称 | 组分规格 | 组分货号 | 保存条件 | 有效期 |
RAW264.7 破骨诱导基础培养基A液 | 25ml | QS-S505-A | 2~8℃ | 12 months |
RAW264.7 破骨诱导基础培养基B液 | 67.5ml | QS-S505-B | 2~8℃ | 12 months |
RAW264.7 破骨诱导添加物A | 7.5ml | QS-S505-C | -20℃ | 24 months |
RAW264.7 破骨诱导添加物B | 375ul | QS-S505-D | -20℃ | 12 months |
使用方法
1、细胞接种
取对数生长期的RAW264.7细胞,用RAW264.7破骨诱导基础培养基A液将RAW264.7细胞制成细胞悬液(无血清),按照2.0-2.5×104 cells/孔的细胞密度接种于24孔板中,于37℃,5% CO2培养环境下培养12h;
2、诱导培养基配制
将添加物A和添加物B按照比例添加到基础培养基B液中;
3、细胞分化诱导
细胞接种12h贴壁后,弃掉培养基,更换配置好的诱导培养基,每2-3天更换一次诱导培养基,有较为明显的多核破骨细胞出现时,即可终止细胞诱导时间,并进行后续染色鉴定;
4、吉姆萨染色鉴定
a. 细胞固定
吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30~60 min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
b. TRAP染色
NOTE:如果诱导前,RAW264.7细胞镜下出现较多伪足时,细胞分化情况严重,这时的细胞不适合用于诱导破骨;RAW264.7细胞的传代次数对其能否诱导成破骨细胞至关重要,代数越低,细胞的分化能力越高。
注意事项
1. 本产品组分均为无菌分装,可直接配制成完全培养基使用。
2.诱导培养基储存条件:2~8℃,避光;配制后有效期:2 weeks,配制后请在有效期内使用完毕。
3. 本品可分装冻存,避免反复冻融,使用时注意无菌操作。
4. 本产品仅用于科研实验,不可用于临床治疗。