旗赛生物科技（武汉）有限公司
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产品简介
间充质干细胞成脂诱导分化培养基是一款专用于间充质干细胞（MSCs）体外诱导分化成脂细胞的培养基。可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成脂分化。
详细信息
组分名称 | 组分规格 | 组分货号 | 保存条件 | 有效期 |
间充质干细胞成脂诱导基础培养基A液 | 87.5ml | QS-S503-A | 2~8℃ | 12 months |
间充质干细胞成脂诱导添加物A液 | 2.5ml | QS-S503-B | -20℃ | 12 months |
间充质干细胞成脂诱导胎牛血清A液 | 10ml | QS-S503-C | -20℃ | 24 months |
间充质干细胞成脂诱导基础培养基B液 | 88.5ml | QS-S503-D | 2~8℃ | 12 months |
间充质干细胞成脂诱导添加物B液 | 1.5ml | QS-S503-E | -20℃ | 12 months |
间充质干细胞成脂诱导胎牛血清B液 | 10ml | QS-S503-F | -20℃ | 24 months |
使用方法
1. 成脂诱导分化操作
1.1 明胶包被培养器皿
干细胞培养较长时间后，可能会出现脱壁卷边或漂浮现象，建议使用0.1%明胶溶液对培养器皿进行包被。准备合适的培养器皿，取适量明胶覆盖底面，37°C静置30 min，吸取晾干即可使用。
1.2 接种干细胞
取对数生长期的细胞，按照1.0-2.0×10e4 cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO2培养环境下培养至汇合度90%左右，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基A液。
1.3 细胞分化诱导
37℃，5% CO2培养环境下培养约3d后，更换为成脂诱导分化培养基B液，培养1d后，再更换为成脂诱导分化培养基A液。A液和 B 液交替使用，期间需每天观察细胞状态。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小，决定终止细胞诱导的时间，并进行染色鉴定。
2. 染色鉴定
2.1 细胞固定
吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30~60 min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
2.2 油红O染色
取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液（油红O原液: 生理盐水=3:2），现用现配。配制后可对油红O工作液进行离心，以沉淀染色液中的过饱和析出物。向清洗干净的诱导孔内加入适量油红O工作液，静置染色30min。吸走油红O工作液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
2.3 诱导评估
显微镜下观察成脂染色效果，并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时，脂滴与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE: 干细胞的成脂分化水平因细胞类型、细胞供体来源，培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
注意事项
1. 本产品组分均为无菌分装，可直接配制成完全培养基使用。
2. 完全培养基储存条件：2~8℃，避光；配制后有效期：2 weeks，配制后请在有效期内使用完毕。
3. 本品可分装冻存，避免反复冻融，使用时注意无菌操作。
4. 本产品仅用于科研实验，不可用于临床治疗。
