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细胞背景介绍:
细胞来源:正常人结肠组织
结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠成纤维细胞主要分布于外膜(纤维膜或浆膜)结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。
刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布
分离方法简介:
原代人结肠成纤维细胞采用胶原酶消化法结合人结肠成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
细胞培养信息:
细胞名称 | 原代人结肠成纤维细胞 |
培养条件 | 人结肠成纤维细胞完全培养基 |
气相:空气,95%;CO2,5% | |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
换液频率 | 2-3天/次 |
传代特性 | 可传3-5代,3代以内状态最佳;首次传代建议1:2传代 |
注意事项 | 消化液选择0.25%胰酶+0.02%EDTA |
细胞鉴定:
免疫荧光鉴定指标:Vimentin;纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。