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如何慧眼辨污染？
Q1: 怀疑细胞有污染该如何判定？
第1步，肉眼观察；
培养基的颜色是否变黄？液体是否变浑浊？
第2步，显微镜观察（200X、 400X）；
培养基里是否有快速游动的颗粒物在做非布朗运动？细胞空隙间和培养液中是否有细沙一样的东西覆盖？培养皿内是否长有“小蘑菇”？细胞状态是否发生变化？
Q2: 细胞污染的种类有哪些？
（1）细菌污染：出现细菌污染的细胞，培养基会显著变黄、变浑浊，显微镜下可见球状、杆状等细菌在培养基中不规则快速游动，细菌形态规则、分布均匀。细菌污染后，胞内颗粒增多、增粗，最后变圆脱落死亡；
（2）真菌/霉菌污染：出现真菌污染的细胞，培养基颜色通常无变化，在污染早期很难发现，显微镜下可见真菌菌丝。在真菌/霉菌污染2-3天后，培养基中会形成肉眼可见的白色或黄色真菌菌落，显微镜下可观察到菌落结构。真菌污染后，细胞生长变慢，最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡；
（3）支原体污染：无法通过肉眼或显微镜直接进行观察，出现支原体感染的细胞，细胞状态会明显变差，生长缓慢，细胞碎片增多，可使用PCR检测法、一步显色法、荧光染色法进行验证；
Q3： 已经发现有细胞污染，该如何解决呢？
（1）细菌污染，若发现较早，细胞状态未受影响，可以尝试用10%的双抗清洗去除，或使用庆大霉素50U/mL、四环素10μg/mL等其它抗生素；若细胞状态已经很差，建议直接丢弃，重新复苏；
（2）真菌污染，难以去除，建议直接丢弃；
（3）支原体污染，加入50ug/mL支原体清除试剂，处理至少2周；
